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        上海通蔚實(shí)生物兔TXA2 ELISA試劑盒簡(jiǎn)介
        更新時(shí)間:2024-05-20   點(diǎn)擊次數:171次

        上海通蔚實(shí)生物兔TXA2 ELISA試劑盒簡(jiǎn)介

        自體活性物質(zhì)之一,在體內由脫羧基而成,組織中的組胺是以無(wú)活性的結合型存在于肥大細胞和嗜堿性粒細胞的顆粒中,皮膚、支氣管粘膜、腸粘膜和神經(jīng)系統中含量較多。當機體受到理化刺激或發(fā)生過(guò)敏反應時(shí),可引起這些細胞脫顆粒,導致組胺釋放,與組胺受體結合而產(chǎn)生.生物效應??菇M胺是拮抗組胺對兔體的.生物效應,即應用抗組胺藥物??菇M胺受體就是拮抗組胺的H1和H2受體。由于此兩種受體在兔體內分布不同而產(chǎn)生不同的效應,它是抗組胺藥應用治療疾病的生理藥理基礎。

        兔TXA2 ELISA試劑盒實(shí)驗條件選擇

        ELISA中,進(jìn)行各項實(shí)驗條件的選擇是很重要的,其中包括:

        (1)固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進(jìn)行篩選:用等量抗原包被,在同一實(shí)驗條件下進(jìn)行反應,觀(guān)察其顯色反應是否均一性,據此判明其吸附性能是否良好。

        (2)包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時(shí),要求純度要好,吸附時(shí)一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時(shí)間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃ 18~24小時(shí)。蛋白質(zhì)包被的zui適濃度需進(jìn)行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進(jìn)行包被后,在其它試驗條件相同時(shí),觀(guān)察陽(yáng)性標本的OD值。選擇OD值zui大而蛋白量zui少的濃度。對于多數蛋白質(zhì)來(lái)說(shuō)通常為1~10μg/ml。

        (3)酶標記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價(jià)的滴定(見(jiàn)酶標記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法"(包被物、待檢樣品的參考品及酶標記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實(shí)驗系統里準確地滴定其工作濃度。

        (4)酶的底物及供氫體的選擇:對供氫體的選擇要求是價(jià)廉、安全、有明顯地顯色反應,而本身無(wú)色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應注意防護。有條件者應使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是目前較為滿(mǎn)意的供氫體。底物作用一段時(shí)間后,應加入強酸或強堿以終止反應。通常底物作用時(shí)間,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入。

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        上海通蔚生物科技有限公司

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